 |
10000U طلا رونوشت معکوس PCR R3002 بی رنگ ظاهر
جزئیات محصول:
| محل منبع: | چین |
| نام تجاری: | GDSBio |
| گواهی: | / |
| شماره مدل: | R3002 |
پرداخت:
| مقدار حداقل تعداد سفارش: | 1 کیسه |
|---|---|
| جزئیات بسته بندی: | بسته بندی کوچک یا توزیع فله یا OEM |
| زمان تحویل: | 8 روز کاری |
| شرایط پرداخت: | L/C، D/A، D/P، T/T، Western Union، MoneyGram |
| قابلیت ارائه: | 100 کیسه / کیسه در روز |
|
اطلاعات تکمیلی |
|||
| گربه خیر: | R3002 | تمرکز: | 10000 U |
|---|---|---|---|
| ظاهر: | بی رنگ | گروه: | معرف های PCR ترانس کریپتاز معکوس |
| فعالیت: | عبور | قابلیت تقویت: | / |
| چاپ لوگو: | با چاپ لوگو | بسته حمل و نقل: | بسته بندی |
| ظرفیت تولید: | 100 کیسه / کیسه در روز | شرایط نگهداری: | در دمای 20- درجه سانتی گراد نگهداری شود |
| برجسته: | رونوشت معکوس طلا PCR,10000 U Reverse Transcriptase PCR,10000U رونوشت معکوس |
||
توضیحات محصول
رونوشت معکوس طلایی R3002 (10000U)
جیترانس کریپتاز معکوس قدیمی
فقط برای استفاده تحقیقاتی
اجزاء
| جزء | R3001 (2،000 U) | R3002(10،000 U) |
| 5 × بافر طلا | 100 میکرولیتر | 500 میکرولیتر |
| رونوشت معکوس طلا (200 U/μl) | 10 میکرولیتر | 50 میکرولیتر |
ذخیره سازی
این معرف باید در دمای -30 تا 15 درجه سانتیگراد نگهداری شود.
شرح
رونوشت معکوس طلا یک ترانس کریپتاز معکوس جدید است که توسطدرونکشتگاهیتکامل مولکولی بر اساس M-MLV (RNase H-) رونوشت معکوس.اولین رشته cDNA را می توان در دمای 37 تا 55 درجه سانتی گراد سنتز کرد.رونوشت معکوس طلا به طور قابل توجهی حساسیت، ویژگی، پایداری حرارتی و نیمه عمر را بهبود بخشیده است که برای رونویسی معکوس الگوهای RNA با ساختار ثانویه پیچیده بسیار مناسب است.رونوشت معکوس طلا دارای توانایی پلیمریزاسیون و گسترش قوی تری است که می تواند برای سنتز cDNA طولانی و ساخت نسبت بالایی از کتابخانه cDNA تمام قد استفاده شود.
Unitدیتعریف
پلی (rA)·Oligo (dT) به عنوان الگو/پرایمر استفاده شد.در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 10 دقیقه، مقدار آنزیم مورد نیاز برای افزودن 1 نانومول dTTP به عنوان یک ماده نامحلول در اسید به عنوان 1 واحد فعالیت (U) تعریف شد.
سعالی بودنسیکنترل کنید
تشخیص باقی مانده اگزونوکلئاز: 200 واحد از این محصول و 50 pmol سوبسترای DNA تک رشته ای به مدت 16 ساعت در دمای 37 درجه سانتیگراد انکوبه شدند و نوار الکتروفورز DNA پس از دناتوراسیون الکتروفورز PAGE تغییری نکرد.
تشخیص باقی مانده اندونوکلئاز: 200 واحد از این محصول و 0.3 میکروگرم DNA pBR322 در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 4 ساعت انکوبه شدند و نوارهای الکتروفورز پلاسمیدها با الکتروفورز ژل آگارز تغییر نکردند.
تشخیص باقی مانده RNase: محصول 200 U و 1 میکروگرم RNA سلولی 293 در دمای 37 درجه سانتی گراد به مدت 30 دقیقه انکوبه شدند و نوار الکتروفورز RNA با الکتروفورز ژل آگارز بدون تغییر ماند.
E.coliتشخیص باقی مانده DNA: باقی مانده اسید نوکلئیک در 60 U توسطE.coliTaqMan qPCR مخصوص gDNA و باقیماندهE.coliژنوم کمتر از 10 نسخه بود.
تشخیص عملکردی 1: آنزیم 200 U به سیستم رونویسی معکوس اضافه شد، 1 میکروگرم RNA کل سلول های HeLa به عنوان الگو، Oligo (dT) استفاده شد.23به عنوان آغازگر، و واکنش در دمای 50 درجه سانتیگراد به مدت 45 دقیقه انجام شد. محصول cDNA 1/10 برای تکثیر PCR گرفته شد.VINژنالکتروفورز ژل آگارز با رنگ آمیزی EB یک باند 4.6 کیلوبایتی را نشان داد.
تشخیص عملکردی 2: آنزیم 200 U به سیستم رونویسی معکوس اضافه شد، 1 pg RNA کل سلول HeLa به عنوان الگو، Oligo (dT) استفاده شد.23به عنوان آغازگر، و واکنش در دمای 50 درجه سانتی گراد به مدت 30 دقیقه انجام شد. محصول cDNA 1/10 برای تکثیر PCR گرفته شد.GAPDHژنالکتروفورز ژل آگارز با رنگ آمیزی EB یک نوار 550 جفت باز را نشان داد.
تشخیص عملکردی 3: 500 نانوگرم RNA کل سلول های HeLa به عنوان الگو، الیگو (dT)23VN به عنوان پرایمر، واکنش 50 درجه سانتی گراد به مدت 45 دقیقه. 1/10 محصول cDNA برای تکثیر PCR از محصول گرفته شد.قطبژن. الکتروفورز ژل آگارز، رنگ آمیزی EB، یک باند 7.1 کیلوبایتی (غنی از gc) دیده می شود.
مسائلنادینگآتوجه
جلوگیری از آلودگی RNase
لطفاً منطقه آزمایش را تمیز نگه دارید. در حین کار باید از دستکش و ماسک تمیز استفاده شود.بدون RNase باید برای لوله های گریز از مرکز، نوک پیپت و سایر مواد مصرفی مورد استفاده در آزمایش اطمینان حاصل شود.
پرایمرها را انتخاب کنیدیون
آزمایش بعدیمنs PCR
اگر الگو منشا یوکاریوتی داشته باشد، Oligo dT به طور کلی ترجیح داده می شود، که با دم 3 'Poly A از mRNA یوکاریوتی برای حداکثر بازده cDNA تمام قد جفت می شود.
پرایمرهای اختصاصی ژن (GSP) دارای بالاترین ویژگی هستند. با این حال، در برخی موارد، GSP مورد استفاده برای واکنش PCR نمی تواند به طور موثر سنتز اولین رشته cDNA را هدایت کند. در این مرحله، رونویسی معکوس می تواند با استفاده از Oligo dT یا Random دوباره انجام شود. هگزامرها
هگزامرهای تصادفی کمترین ویژگی را دارند و همه RNAها، از جمله mRNA، rRNA و tRNA، می توانند به عنوان الگوی هگزامرهای تصادفی استفاده شوند. هگزامرهای تصادفی زمانی می توانند به عنوان آغازگر استفاده شوند که ناحیه هدف دارای ساختار ثانویه پیچیده یا محتوای GC بالا باشد. ، یا زمانی که الگو پروکاریوتی است و استفاده از Oligo dT یا آغازگرهای اختصاصی ژن (GSP) نمی تواند به طور موثر سنتز cDNA را هدایت کند.
آزمایش بعدیمنسqPCR
الیگو dT مخلوط با هگزامرهای تصادفی منجر به کارایی سنتز cDNA یکسان در هر ناحیه از mRNA شد که به بهبود صحت و تکرارپذیری نتایج کمی کمک کرد.
Dongsheng Biotech سری های مختلفی از محصولات را برای کمک به شما در دستیابی به موفقیت PCR ارائه می دهد.برای آنزیم ها، Taq Polymerase، HS Taq DNA Polymerase، FS Taq DNA Polymerase، Pfu DNA Polymerase و Fusion Pfu DNA Polymerase عملکرد PCR با دقت بالا، کارآمد و با حساسیت را ارائه می دهند.ما همچنین Long Taq DNA Polymerase برای عملکرد طولانی PCR داریم.
