<i>Cat.</i> <b>گربه</b> <i>No.</i> <b>خیر</b>: | N9017 | اندازه: | 100 میلی گرم |
---|---|---|---|
تمرکز: | حاوی پروتئیناز K (≥95%) | ظاهر: | پودر سفید |
گروه: | محصولات تشخیصی In Vitro | فعالیت خاص: | ≥30 U/mg پروتئین |
چاپ لوگو: | با چاپ لوگو | بسته حمل و نقل: | بسته بندی |
ظرفیت تولید: | 100 کیسه / کیسه در روز | شرایط نگهداری: | در دمای -20 درجه سانتی گراد نگهداری شود |
برجسته: | محصولات تشخیصی GDSBio In Vitro,محصولات تشخیصی در شرایط آزمایشگاهی درجه بیولوژی مولکولی,محلول 100 میلی گرم پروتئیناز K |
پروتئیناز K پودر
درجه زیست شناسی مولکولی، فقط برای استفاده تحقیقاتی
گربه شماره N9016
حجم: 100 میلی گرم
فعالیت ویژه: ≥30 U/mg پروتئین
فرم: حاوی پروتئیناز K (≥95٪)، پودر لیوفیلیزه است
اجزاء
مولفه | N90116 |
پودر پروتئیناز K |
100 میلی گرم |
ذخیره سازی
-20 درجه سانتیگراد توصیه می شود.ماندگاری پودر لیوفیلیزه پروتئیناز K در صورت نگهداری در بسته و خشک در دمای زیر 4 درجه سانتیگراد سه سال است.پودر لیوفیلیزه پروتئیناز K در دمای اتاق ارسال می شود.
شرح
پروتئیناز K یک پروتئاز اندولیتیک است که پیوندهای پپتیدی را در سمت کربوکسیلیک اسیدهای آمینه آلیفاتیک، معطر یا آبگریز می شکند.پروتئیناز K به عنوان یک پروتئاز سرین طبقه بندی می شود.کوچکترین پپتیدی که توسط این آنزیم هیدرولیز می شود یک تتراپپتید است.
امکانات
• پروتئیناز نوترکیب K
• در طیف وسیعی از محصولات واکنش فعال است
برنامه های کاربردی
• جداسازی DNA ژنومی از سلول ها و بافت های کشت شده
• حذف DNase ها و RNase ها هنگام جداسازی DNA و RNA از بافت ها یا رده های سلولی
• تعیین محلی سازی آنزیم
• بهبود کارایی شبیه سازی محصولات PCR
کنترل کیفیت
فعالیت DNase:هیچ فعالیت آنزیمی پس از 6 ساعت انکوباسیون با DNA λ در دمای 37 درجه سانتیگراد قابل تشخیص نیست.
فعالیت RNase:هیچ فعالیت ریبونوکلئازی پس از 16 ساعت انکوباسیون با RNA در دمای 25 درجه سانتیگراد قابل تشخیص نیست.
منبع
از سلولهای مخمر با ژن شبیهسازیشده رمزکننده آلبوم Engyodontium دستکاری شده ژنتیکی (آلبوم Tritirachium) پروتئاز اندولیتیک.
وزن مولکولی
مونومر 29.3 کیلو دالتون.
تعریف واحد فعالیت
یک واحد آنزیم با استفاده از هموگلوبین دناتوره شده به عنوان سوبسترا، اسیدهای آمینه مثبت فولین و پپتیدهای مربوط به 1 میکرومول تیروزین را در 1 دقیقه در دمای 37 درجه سانتی گراد، pH 7.5 آزاد می کند.
فعالیت آنزیم در مخلوط زیر اندازه گیری می شود: 0.08 مولار فسفات پتاسیم (pH 7.5)، 5 مولار اوره، 4 میلی مولار NaCl، 3 میلی مولار کلسیم کلسیم.2و 16.7 mg/ml هموگلوبین.
دستورالعمل های آماده سازی
محلول استوک را می توان به صورت 80-40 میلی گرم در میلی لیتر در بافر رقت [20 میلی مولار Tris-HCl (pH 7.4)، 1 میلی مولار CaCl تهیه کرد.2] یا [20 میلی مولار Tris-HCl (pH 7.4)، 1 میلی مولار کلسیم کلسیم2،2% گلیسرول]، با استفاده از فیلتر 0.22μm استریل شده و در غلظت نهایی 20-40mg/ml در گلیسرول 50% عرضه شد.در مقادیر کافی در محدوده دمایی وسیع از 24 درجه سانتیگراد تا 80- درجه سانتیگراد نگهداری شود.
غشاهای PES و PVDF با اتصال کم پروتئین در فیلتراسیون استریل توصیه می شوند.
مهار و غیر فعال سازی
مهارکنندهها: پروتئیناز K توسط شلاتهای فلزی، واکنشگرهای تیول یا مهارکنندههای تریپسین و کیموتریپسین خاص غیرفعال نمیشود.فنیل متیل سولفونیل فلوراید و دی ایزوپروپیل فسفروفلووریدات آنزیم را کاملاً مهار می کنند.
با حرارت دادن در دمای 95 درجه سانتی گراد به مدت 10 دقیقه غیرفعال می شود.
توجه داشته باشید
• فعالیت بهینه در دمای 50-55 درجه سانتی گراد.
• دناتوره شدن سریع آنزیم در دمای بالاتر از 65 درجه سانتیگراد رخ می دهد.
• غلظت کاری توصیه شده برای Proteinase K 0.05-1 mg/ml است.فعالیت آنزیم توسط 0.2-1٪ SDS یا 1-4 مولار اوره تحریک می شود.
• Ca2+از پروتئیناز K در برابر اتولیز محافظت می کند، پایداری حرارتی را افزایش می دهد و یک عملکرد تنظیمی برای محل اتصال سوبسترای پروتئیناز K دارد.
• پایدار در محدوده وسیع pH: 4.0-12.5، pH بهینه 7.5-8.0.
Dongsheng Biotech سری های مختلفی از محصولات را برای کمک به شما در دستیابی به موفقیت PCR ارائه می دهد.برای آنزیم ها، Taq Polymerase، HS Taq DNA Polymerase، FS Taq DNA Polymerase، Pfu DNA Polymerase و Fusion Pfu DNA Polymerase عملکرد PCR با دقت بالا، کارآمد و با حساسیت را ارائه می دهند.ما همچنین Long Taq DNA Polymerase برای عملکرد طولانی PCR داریم.